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紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的技術(shù)指標(biāo)

作者: 時(shí)間:2014-03-03 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò) 收藏
熟悉紫外可見(jiàn), 是最重要、最關(guān)鍵的核心問(wèn)題;不管是紫外可見(jiàn)的使用者還是制造者, 都必須重視這個(gè)問(wèn)題。對(duì)制造者來(lái)講, 做出的紫外可見(jiàn)儀器應(yīng)該好用。所謂“ 好用”,就是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)“ 穩(wěn)定可靠”。所謂“ 穩(wěn)定”, 就是漂移小、重復(fù)性好。所謂“ 可靠”, 就是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的分析測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確度高( 可靠性的含義將在本書(shū)后面詳細(xì)討論, 此不贅述)。而準(zhǔn)確度又與雜散光、光度噪聲、基線(xiàn)平直度、光譜帶寬等許多有關(guān)。對(duì)于使用者來(lái)講, 就是要用好紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。要用好一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì), 首先要認(rèn)真閱讀儀器的使用說(shuō)明書(shū), 要對(duì)儀器的結(jié)構(gòu)有初步了解, 能正確操作儀器, 掌握儀器的基本保養(yǎng)維護(hù)知識(shí)。特別要認(rèn)真了解儀器的及其物理意義與簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法, 以及這些技術(shù)指標(biāo)相互之間的關(guān)系與對(duì)分析測(cè)試結(jié)果誤差的影響。以便經(jīng)常檢測(cè)儀器的技術(shù)指標(biāo), 保證儀器工作在最佳狀態(tài)。

  ( Photometric Accur acy ) 是一個(gè)非常重要的技術(shù)指標(biāo)。任何使用者買(mǎi)一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)都是為了分析工作, 進(jìn)行分析工作的目的是出數(shù)據(jù), 其基本要求是數(shù)據(jù)要準(zhǔn)確可靠, 這在很大程度上取決于儀器的這個(gè)最重要的技術(shù)指標(biāo)及其有關(guān)指標(biāo)。

  一、的表示方法

  目前, 國(guó)際上對(duì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的表示方法主要有兩種:一種是吸光度準(zhǔn)確度( Absorbance Accuracy ) 或吸光度誤差( AbsorbanceEr ror ) , 用AA (或ΔA) 表示; 另一種是透射比準(zhǔn)確度( Transmittance Accuracy) 或透射比誤差, 用TA ( 或ΔT) 表示。國(guó)外的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)制造商, 絕大多數(shù)都給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) , 并都指出在什么吸光度情況下測(cè)量。如美國(guó)Varian 公司的Cary500、Lambda900 等儀器, 都給出在1. 0Ab s 時(shí), 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 為±0. 003Ab s。

  但國(guó)外有少數(shù)儀器制造商在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 的同時(shí), 還給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA(或ΔT)。我國(guó)生產(chǎn)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的廠商, 很多都在給出吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 的同時(shí), 也給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA或ΔT)。

  一般來(lái)說(shuō),只給透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA (或ΔT) ,而不給吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 是不合適的, 原因如下:

  第一,若給出TA (或ΔT) = ±0. 5%T, 而不講明在什么透射比情況下測(cè)試, 就應(yīng)理解為在0~100%T 范圍內(nèi)的任何地方測(cè)試都能達(dá)到TA (或ΔT) = ±0. 5% T。但實(shí)際上, 若在10% T 處測(cè)量, TA ( 或ΔT) = ±0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的透射比相對(duì)誤差為±5%。而在90%T 處測(cè)量, 則TA (或ΔT) = ±0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的透射比相對(duì)誤差為±0. 56% , 二者相差很大。也就是說(shuō), 不可能在0~100%T 范圍內(nèi)的任何地方測(cè)試都能達(dá)到TA (或ΔT) = ±0. 5% T。

第二, 用戶(hù)在使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí), 基本上沒(méi)有人只用透射比T 和透射比誤差T A ( 或ΔT)來(lái)表示光度準(zhǔn)確度和分析測(cè)試誤差。相反, 大家一般都用吸光度值A(chǔ) 和吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 來(lái)表示分析測(cè)試結(jié)果和分析誤差。

  第三, 目前國(guó)際上絕大多數(shù)使用者, 都是采用吸光度值A(chǔ)和吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 來(lái)表示紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的分析測(cè)試結(jié)果和分析誤差。

  第四, 吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A (或ΔA) 和透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT) , 在使用時(shí)二者在數(shù)值上會(huì)相差很大。若要把TA(或ΔT) = ±0. 5% T 換算成AA ( 或ΔA) , 則在10% T 處( 相當(dāng)在1A 處) ,±0. 5% T 的透射比誤差, 產(chǎn)生的AA ( 或ΔA ) 為±0. 022A, 而在90% T 處(相當(dāng)在0. 0046A 處) , TA ( 或ΔT) = ± 0. 5% T 時(shí)產(chǎn)生的AA ( 或ΔA) 為±0. 0024A, 這同樣是一個(gè)驚人的差距。因此, 在給出一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度時(shí), 不管是用吸光度準(zhǔn)確度或吸光度誤差A(yù)A ( 或ΔA) 表示,還是用透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT) 表示, 都應(yīng)該指出在多少吸光度或在多少透射比情況下測(cè)試。

  但是, 目前仍有許多廠商在給出透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA ( 或ΔT)時(shí), 都一律寫(xiě)成±0. 3% T。特別是許多制造廠商對(duì)自稱(chēng)是高檔紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的儀器, 基本上都是寫(xiě)成“ ±0. 3% T ( 0~100% T )”。如日本島津的UV-2401PC、UV-2450PC、UV-2550PC 等紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。從理論上講任何高檔紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的透射比準(zhǔn)確度或透射比誤差TA (或ΔT) 不可能在0~100% T 內(nèi)都能達(dá)到±0. 3%T 的透射比準(zhǔn)確度。

  目前,國(guó)內(nèi)外都有一些廠商在說(shuō)明書(shū)或儀器樣本中稱(chēng)“光度準(zhǔn)確度”為“測(cè)光精度”, 這種稱(chēng)謂混淆了準(zhǔn)確( Accuuracy) 和精密度( Pr ecision ) 的概念。準(zhǔn)確度是指的測(cè)量值與理論值之差, 該偏差越小說(shuō)明測(cè)量的數(shù)據(jù)越準(zhǔn)確可靠, 或者說(shuō)光度準(zhǔn)確度越高。而精密度是指的分析測(cè)試數(shù)據(jù)的離散性或重復(fù)性, 是指同一操作者, 在一次開(kāi)機(jī)中連續(xù)重復(fù)多次測(cè)試某一吸收峰的吸光度值中最大與最小值之差。該差值越小, 說(shuō)明該儀器的光度重復(fù)性越好。

  正確的說(shuō)法應(yīng)該是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的“光度準(zhǔn)確度” 而不能說(shuō)成“測(cè)光精度”。光度精密度或光度重復(fù)性是指多次測(cè)量中的離散性。如3 次或5 次測(cè)量中吸光度的最大值與最小值之差即為光度精密度或光度重復(fù)性。而準(zhǔn)確度則是指實(shí)際測(cè)量的吸光度值與真值或理論值之差。

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