共焦距顯微技術(shù)及其應(yīng)用

共焦距顯微技術(shù)是一種獲得高分辨率圖像和3D重構(gòu)的寶貴工具。共焦距顯微技術(shù)最重要的功能是能夠從樣片內(nèi)部隔離和收集焦點平面，由此消除熒光樣片中常見的模糊不清的“薄霧”。如何將該技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)療設(shè)備中？請看本文的介紹。

共焦距顯微技術(shù)是一種獲得高分辨率圖像和3D重構(gòu)的寶貴工具。共焦距顯微技術(shù)最重要的功能是能夠從樣片內(nèi)部隔離和收集焦點平面，由此消除熒光樣片中常見的模糊不清的“薄霧”。精美的細(xì)節(jié)通常被薄霧弄得模糊不清，無法用非共焦距、熒光顯微技術(shù)檢測到。

在此應(yīng)用中使用DLP技術(shù)使用戶能夠輕松改變觀察條件，消除影響查看的不想要的振動。DLP技術(shù)的用途有兩個：掃描和配置照明與檢測針孔陣列。照明針孔通過以下方式創(chuàng)建：打“開”一個微鏡，而使周圍的鏡保持“關(guān)閉”狀態(tài)。因此只有這一個微鏡反射的光會透過光學(xué)系統(tǒng)。此微鏡在物鏡中的圖像充當(dāng)聚焦于物體的照明針孔。然后，在此針點碰到樣片后“反射”的光會重新聚集到 DMD的同一微鏡上。

通常，當(dāng)某個物體在熒光顯微鏡中成像時，產(chǎn)生的信號來自全厚度樣本，該樣本不允許大多數(shù)信號聚焦到查看器。共焦距顯微技術(shù)通過位于平面像前面的共焦距“針孔”去除這種對焦不準(zhǔn)的信息，此針孔充當(dāng)空間濾波器，僅允許焦距對準(zhǔn)部分的光成像。

要使整個視野成像，可通過以覆蓋整個視野的時變模式轉(zhuǎn)換開關(guān)鏡來配置馬賽克。使用水平掃描并按每個垂直位置一個微鏡幾次來轉(zhuǎn)換模式，就可掃描整個樣片領(lǐng)域。然后在DMD執(zhí)行掃描時使用CCD相機(jī)拍攝一個完整連續(xù)的圖像。